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適用于培養(yǎng)內(nèi)皮細胞,即用型。
Endopan 300內(nèi)皮細胞無血清培養(yǎng)基P04-00650儲存方法:2-8℃
應(yīng)用:
Endopan 300內(nèi)皮細胞無血清培養(yǎng)基P04-00650應(yīng)用于人來源的T細胞培養(yǎng)擴增,培養(yǎng)基需要添加刺激性抗體和細胞因子,另外每升培養(yǎng)基需要添加20ml 200mM的L。
操作:
平板培養(yǎng):
1. 按照已確定的方法來準備新鮮或者凍存的 PBMNCs (外周血單個核細胞)
2. 用血計數(shù)器計數(shù)細胞數(shù)量
3. 轉(zhuǎn)移適當數(shù)量的細胞到含有培養(yǎng)基(已加入細胞因子和刺激抗體)的培養(yǎng)瓶中
4. 把培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中, 37°C , 5% CO2 培養(yǎng).
產(chǎn)品特性:
Nobimpex 無血清 T 細胞培養(yǎng)基 (Product number N103-1000) 已經(jīng)經(jīng)過嚴格的測試可用于 PBMNC 中的 T 細胞擴增。本產(chǎn)品已與其他幾種商業(yè)化可用的無血清培養(yǎng)基做了 T 細胞擴增比較。實驗中,200,000 PBMNCs/ml 在本產(chǎn)品和另一商業(yè)化培養(yǎng)基中培養(yǎng) 7 天,培養(yǎng)基含有 100 IU/ml IL-2 和 anti-CD3 (OKT3, 20ng/ml) 抗體。.
實驗中擴增的 T-細胞使用 51 鉻釋放分析來測試細胞溶解能力。靶細胞 (K562, 人慢性白血病細胞), 使用 51 鉻標記并連接到 anti-CD3 (OKT3) Fc 受體.。當與效應(yīng)或者細胞毒 T 細胞混合時,,靶細胞就會凋亡或者溶解,并釋放 51 鉻.。上清中 51 鉻的釋放量與靶細胞的死亡及功能 T 細胞的數(shù)量成正比。
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